細(xì)菌培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室是微生物實(shí)驗(yàn)室里面的配套實(shí)驗(yàn)室,細(xì)菌培養(yǎng)室用人工方法(使其在合適的溫度,濕度,光照度,PH值,潔凈度等環(huán)境下,使細(xì)菌生長(zhǎng)繁殖,培養(yǎng)出來的細(xì)菌用于研究、鑒定和應(yīng)用。廣泛用于醫(yī)藥研究。
室內(nèi)要求無菌操縱,要求工作環(huán)境和條件必須保證無微生物污染和不受其它有害因素的影響.細(xì)胞培養(yǎng)室和設(shè)計(jì)原則是防止微生物污染和有害因素影響,要求工作環(huán)境清潔,空氣清新,干燥和無煙塵.細(xì)胞培養(yǎng)室的設(shè)計(jì)原則一般是無菌操縱區(qū)設(shè)在室內(nèi)較少走動(dòng)的內(nèi)側(cè),常規(guī)操縱和封閉培養(yǎng)于一室,而洗刷消毒在另一室.與其他一般實(shí)驗(yàn)室工作的主要區(qū)別在于要求保持無菌操作,避免微生物及其他有害因素的影響。一般標(biāo)準(zhǔn)的細(xì)胞培養(yǎng)室應(yīng)包括配液室、準(zhǔn)備室和培養(yǎng)室。三室既相互連接又相對(duì)獨(dú)立,各自完成培養(yǎng)過程中的不同操作。
細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室的設(shè)置
細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)能進(jìn)行六方面的工作:無菌操作、孵育、制備、清洗、消毒滅菌處理、儲(chǔ)藏。
植物細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室設(shè)置
1.基本實(shí)驗(yàn)室
1.1洗滌間
根據(jù)工作量的大小決定其大小,一般面積控制在30-50m2。在實(shí)驗(yàn)室的一側(cè)設(shè)置專用的洗滌水槽,用來清洗玻璃器皿。中央實(shí)驗(yàn)臺(tái)還應(yīng)配置2個(gè)水槽,用于清洗小型玻璃器皿。如果工作量大,可以購置一臺(tái)洗瓶機(jī)。準(zhǔn)備1-2個(gè)洗液缸,專門用于洗滌對(duì)潔凈度要求很高的玻璃器皿。此外還應(yīng)配置落水架、干燥箱、柜子、超聲波清洗器等。地面應(yīng)耐濕并排水良好。
1.2培養(yǎng)基配制間
面積60平方米左右,配備的主要儀器設(shè)備有:冰箱、天平、微波爐、pH計(jì)、培養(yǎng)基分裝器、藥品柜、器械柜、抽氣泵、電爐、各種規(guī)格的培養(yǎng)瓶、培養(yǎng)皿、移液管、燒杯、量筒、容量瓶、儲(chǔ)藏瓶等。冰箱以體積180-200L為宜,用于儲(chǔ)存培養(yǎng)基母液、激素維生素等貴重藥品、彩色膠卷、及保存植物材料。天平應(yīng)有不同感量。
1.3消毒間
配備實(shí)驗(yàn)臺(tái)、高壓滅菌鍋、排風(fēng)滅火設(shè)備、細(xì)菌過濾設(shè)備、干熱消毒柜、電爐等。滅菌鍋的選擇應(yīng)根據(jù)不同的要求選擇不同型號(hào)的滅菌鍋。一般實(shí)驗(yàn)室可選用小型的醫(yī)用手提式高壓滅菌鍋,較大的實(shí)驗(yàn)室可選用立式自動(dòng)控制壓力和溫度的滅菌鍋。生產(chǎn)性的實(shí)驗(yàn)室可選用大型的臥式滅菌鍋。
如果沒有條件的話,可以將上述工作間合并成一個(gè)準(zhǔn)備間,要求是設(shè)備的安裝和排列要合理、房間要寬敞、明亮、透風(fēng),地面要便于清潔、防滑。
1.4無菌操作室
無菌操作室主要用于實(shí)驗(yàn)材料的接種操作,所以又叫接種室。通常由里外兩間組成,外間是緩沖間,用于準(zhǔn)備工作,還有防止污染的作用。緩沖間的門應(yīng)該與接種室的門錯(cuò)開,兩個(gè)門也不要同時(shí)開啟,以保證無菌室不因開門和人的進(jìn)出帶進(jìn)雜菌。
緩沖間內(nèi)應(yīng)該設(shè)有水槽、實(shí)驗(yàn)臺(tái)、鞋帽架、和柜子、紫外燈。無菌操作室的內(nèi)壁應(yīng)當(dāng)用塑鋼板或瓷磚裝修,工作人員進(jìn)入操作間前要穿上消過毒的工作服和拖鞋。室內(nèi)應(yīng)配有超凈工作臺(tái),紫外燈、解剖鏡、各種接種器械等。
1.5培養(yǎng)室
為了控制培養(yǎng)室的溫度和光照時(shí)間及其強(qiáng)度,培養(yǎng)室的房間不要窗戶,但應(yīng)當(dāng)留一個(gè)通氣窗,并安上排氣扇。室內(nèi)溫度由空調(diào)控制,光照由日光燈控制。天花板和內(nèi)墻***好用塑料鋼板裝修,地面用水磨石或瓷磚鋪設(shè),一般要分兩間,一為光照培養(yǎng)室,一為暗培養(yǎng)室。培養(yǎng)室外應(yīng)有一預(yù)備間或走廊。
培養(yǎng)室應(yīng)配有培養(yǎng)架、轉(zhuǎn)床、搖床、光照培養(yǎng)箱、生化培養(yǎng)箱、自動(dòng)控時(shí)器等。日光燈一般用40W,固定在培養(yǎng)架的側(cè)面或擱板的下面,每層有兩支日光燈,距離在20cm,光照強(qiáng)度為2000-3000lx。
2.輔助實(shí)驗(yàn)室
2.1鑒定室
細(xì)胞學(xué)鑒定室其功能是對(duì)培養(yǎng)材料進(jìn)行細(xì)胞學(xué)鑒定和研究。要求清潔、明亮、干燥,使各種光學(xué)儀器不受潮濕和灰塵污染。應(yīng)配置各種顯微鏡、照相系統(tǒng)等。生化分析室在以培養(yǎng)細(xì)胞產(chǎn)物為主要目的的實(shí)驗(yàn)室中,應(yīng)建立相應(yīng)的分析化驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室,以便于對(duì)培養(yǎng)物的有效成分隨時(shí)進(jìn)行取樣檢查。離心機(jī)、酶聯(lián)免疫檢測(cè)儀、天平、PCR儀等。2.2、溫室用于試管苗的鍛煉和移植,為試管苗提供滿足生長(zhǎng)的適宜環(huán)境條件。常用設(shè)備有:溫室、彌霧裝置、蔭棚、移栽床、缽、盆、基質(zhì)等.
2.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室設(shè)置
無菌條件:凈化工作室,風(fēng)淋室,傳遞窗,高效過濾器,潔凈層流罩,生物安全柜,超凈工作臺(tái),紫外燈,電熱干燥箱,濾器,高壓滅菌器,抗生素。
細(xì)胞生長(zhǎng)條件:純水蒸餾器,純水儀,培養(yǎng)板,培養(yǎng)瓶,CO2培養(yǎng)箱,培養(yǎng)基,血清細(xì)胞檢測(cè)條件:倒置顯微鏡,酶標(biāo)儀,微孔板震蕩器,高速離心機(jī),移液器。
細(xì)胞保存條件:液氮罐實(shí)驗(yàn)室準(zhǔn)備間緩沖間培養(yǎng)室。
實(shí)驗(yàn)室的要求
?、俸途彌_間相連,緩沖間內(nèi)備消毒服裝和鞋,口罩等,入內(nèi)換上
②設(shè)置1—2臺(tái)超凈工作臺(tái)
?、凼覂?nèi)空氣不流通,有適當(dāng)?shù)墓饩€,清潔,干燥
?、軅?cè)部可設(shè)傳遞窗,用于物品傳遞
?、菡彰饔脽晒鉄魹楹?,消毒用紫外線燈
?、拊谑覂?nèi)工作時(shí),動(dòng)作應(yīng)輕微準(zhǔn)備間內(nèi)設(shè)備
?、俅?、小水槽②消毒設(shè)備③消毒后的物品和器械保藏柜④烘箱
⑤蒸餾器(包括雙蒸,三重蒸餾水)⑥玻璃器皿,培養(yǎng)液等⑦電爐等
注意:
?、倥渲迫芤阂眯迈r的純水,配制過程避免交叉感染
?、谠O(shè)備排列緊湊
?、壑付ㄒ惶幙蓵悍挪晃奂坝卸疚镔|(zhì)準(zhǔn)備間設(shè)備
CO2培養(yǎng)箱:37度+/-0.5度;能調(diào)節(jié)溫度和CO2濃度
消毒器:高壓鍋,蒸汽滅菌鍋,干燥消毒箱
冰箱:4度或-20度家用冰箱,保存一般制劑;-70度保存蛋白制劑
水質(zhì)純化裝置:凈化水質(zhì)用于清洗或配制培養(yǎng)液
另外:顯微鏡,離心機(jī),酸度計(jì),天平,液氮罐、真空泵等。